紫外可见光度计采用的是物质的吸收光谱本质上，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于紫外可见光度计可检测，各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同。因此，
紫外可见光度计可看出每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
在使用前，
紫外可见光度计要调零、调百校准，参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，紫外可见光度计用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。
紫外可见光度计经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去，否则将影响测定结果。紫外可见光度计在色谱分析中，有时基体中可能存在一个以上的和被测组分相距较远的色谱峰，计算机在数据处理中不会计入它们，不影响测定。
紫外可见光度计参比溶液与测量溶液就相差铁离子含量，在测量之前要用不含铁离子的参比溶液扫描。
紫外可见光度计调整仪器后，然后再测量含铁离子溶液的比色皿，这样测量溶液中的铁离子会形成自己特定的峰值，次峰值与数据库里基准峰值对比就可以得出溶液所含量了。如果数据库中没有铁离子的曲线，你还要自己先用不同铁离子浓度的溶液做工作曲线，然后进行测量。
